Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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GABAA Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402715
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GABAA Rα2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GABAA Rα2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GABAA Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402715 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GABRA2 codifica a subunidade α2 do recetor humano GABA\(_A\), um canal de cloreto pentamérico ativado por ligando que medeia a neurotransmissão inibitória rápida no sistema nervoso central. Recetores que contêm GABA\(_A\) Rα2 modulam a inibição sináptica, a excitabilidade neuronal e as oscilações de rede ao acoplar a ligação do GABA ao fluxo de cloreto e à hiperpolarização da membrana. Esta subunidade contribui para a montagem do recetor, o tráfego e a localização sináptica, integrando-se com processos de sinalização que regulam a homeostase iónica e a plasticidade dependente da atividade. Perturbações genéticas e funcionais de GABRA2 têm sido associadas a fenótipos neuropsiquiátricos e relacionados com crises convulsivas, sustentando a sua relevância para estudos mecanísticos da disfunção de circuitos inibitórios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GABAA Rα2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GABRA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GABRA2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GABRA2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GABAA Rα2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GABRA2 para a investigação da sinalização de GABAA Rα2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GABRA2 críticos para a função GABAA Rα2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GABRA2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GABAA Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GABAA Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GABRA2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GABAA Rα2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GABAA Rα2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GABRA2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GABRA2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.