GABA T-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-411007

개요

SLC6A1은 인간 GABA 수송체 1(GABA T-1)을 암호화한다. GABA T-1은 고친화성 Na+/Cl− 의존성 세포막 수송체로, 시냅스 및 시냅스 외 공간에서 γ-아미노부티르산(GABA)을 제거하여 억제성 신경전달을 조절한다. GABA 재흡수를 조절함으로써 GABA T-1은 신경세포 흥분성, 시냅스 타이밍, 네트워크 진동에 영향을 미치며, 수송체 활성을 신경전달물질 순환과 이온 결합 수송 과정과 연결한다. SLC6A1 기능 이상은 신경발달 및 간질 관련 표현형과 연관되어 있으며, 변화된 GABA 항상성은 보다 넓은 범위의 대뇌피질 회로 불균형 기전에 관여하는 것으로 제시되어 왔다. SLC6A1에 대한 실험적 교란은 억제성 신호전달, 수용체 활성화 역학, 그리고 관련 용질 운반체(solute carrier) 수송체에 의한 보상 작용을 경로 수준에서 연구하는 데 근거를 제공한다.

GABA T-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SLC6A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SLC6A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SLC6A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GABA T-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GABA T-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SLC6A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GABA T-1 기능에 중요한 SLC6A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SLC6A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GABA T-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GABA T-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SLC6A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GABA T-1 HDR 플라스미드 (h) 및 GABA T-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SLC6A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SLC6A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.