G3BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424175

Visão geral

G3bp1 codifica a G3BP1, uma proteína de ligação a RNA que inicia a montagem de grânulos de estresse e coordena a triagem de mRNAs durante o estresse celular. Por meio de interações com fatores de iniciação da tradução e componentes de sinalização, a G3BP1 conecta respostas ao estresse a vias que regulam a estabilidade de mRNA, a sinalização imune inata e a apoptose, incluindo comunicação cruzada com programas associados a MAPK e ao interferon. Em sistemas murinos, a G3BP1 é comumente estudada por seus papéis na restrição antiviral e na modulação da sinalização inflamatória, bem como por efeitos mais amplos sobre a proteostase e decisões de destino celular. Dinâmicas desreguladas de grânulos de estresse envolvendo a G3BP1 têm sido associadas a fenótipos de neurodegeneração e relacionados ao câncer em modelos experimentais, reforçando sua relevância para pesquisas sobre mecanismos de doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO G3BP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene G3bp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do G3bp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do G3bp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína G3BP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de G3bp1 para a investigação da sinalização de G3BP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) G3bp1 críticos para a função G3BP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos G3bp1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo G3BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo G3BP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus G3bp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo G3BP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR G3BP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia G3bp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo G3bp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.