Fyn Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400152-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FynO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Fyn (h) e o Plasmídeo Double Nickase Fyn (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FYN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fyn Anticorpo (15): sc-434
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fyn Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fyn Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FYN codifica a Fyn, uma tirosina quinase não receptora da família Src que integra sinais provenientes de recetores imunitários, integrinas e recetores de fatores de crescimento para regular, por meio de fosforilação, o controlo da proliferação, sobrevivência, remodelação do citoesqueleto e tráfego vesicular. A Fyn participa na sinalização do recetor de células T, em vias do recetor de células B e em cascatas a jusante, incluindo PI3K–AKT, MAPK/ERK e sinalização de adesão focal, moldando respostas de adesão e migração. No sistema nervoso, a Fyn modula a plasticidade sináptica através do recetor NMDA e de sinalização associada à mielina, influenciando a diferenciação neuronal e a conectividade. A atividade ou expressão desregulada de FYN está associada a alterações na sinalização imunitária e em redes oncogénicas de quinases, e tem sido implicada em sinalização associada à neurodegeneração e em motilidade celular aberrante.
Fyn O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FYN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FYN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FYN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FYN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.