Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FUS/TLS 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-433326-NIC
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- FUS/TLS Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- FUS/TLS 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 FUS/TLS 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 Fus을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 FUS/TLS Antibody (4H11): sc-47711
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
FUS/TLS 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-433326-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FUS/TLS 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2) | sc-433326-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Fus는 RNA 결합 단백질인 FUS/TLS를 암호화하며, FUS/TLS는 주로 핵에 존재하면서 전사 조절, pre-mRNA 스플라이싱, mRNA 수송, 스트레스 과립(stress granule) 동역학 등 유전자 발현의 여러 단계를 조율하는 인자입니다. FUS/TLS는 복구 기구 및 염색질 연관 복합체와의 상호작용을 통해 DNA 손상 반응과 유전체 유지에 관여하며, RNA 처리 과정과 세포 항상성을 연결합니다. FUS/TLS 기능이 교란되면 신경세포의 RNA 대사와 단백질 항상성(proteostasis)이 변화하고, 비정상적인 세포 내 위치 변화나 응집은 신경퇴행과 광범위하게 연관된 것으로 알려져 있어, Fus는 신경계에서 RNA 생물학의 기전을 연구하는 데 중요한 표적입니다. 마우스 모델에서 Fus를 교란하는 것은 DNA 복구, 스트레스 반응, 신경퇴행성 표현형과 연결된 RNA 조절 네트워크와 경로를 규명하기 위한 다루기 쉬운 시스템을 제공합니다.
FUS/TLS 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Fus 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Fus 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Fus의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Fus 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.