FucT-IV CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401795

개요

FUT4는 골지체에 위치하는 α1,3-푸코실전이효소인 FucT-IV를 암호화하며, 이 효소는 N-아세틸락토사민 수용체에 푸코스를 전이해 당단백질과 당지질 상에 Lewis X형 구조와 같은 푸코실화된 글리칸 에피토프를 생성합니다. FucT-IV는 세포 표면의 글리코실화를 형성함으로써 셀렉틴 매개 부착, 백혈구 이동(trafficking), 그리고 더 광범위한 글리칸 의존적 신호전달 및 수용체 역학에 영향을 줍니다. FUT4의 활성은 푸코스 대사 및 글리코실화 경로와 교차하며, 이는 면역세포 상호작용, 염증 반응, 세포 이동을 조절합니다. FUT4 발현의 이상 조절과 푸코실화 패턴 변화는 문헌에서 종양세포의 침윤성, 전이 관련 부착 표현형, 면역 미세환경과의 상호작용 변화와 연관된 것으로 보고되어, 글리칸 매개 생물학의 기전 연구에 유용한 핵심 지점으로 여겨집니다.

FucT-IV CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FUT4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FUT4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FUT4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FucT-IV 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FucT-IV 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FUT4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FucT-IV 기능에 중요한 FUT4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FUT4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FucT-IV CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FucT-IV CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FUT4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FucT-IV HDR 플라스미드 (h) 및 FucT-IV HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FUT4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FUT4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.