FUCA2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405221

개요

FUCA2는 알파-L-푸코시다아제 2를 암호화하며, 이는 분비되는 리소좀형 글리코시다아제로서 N- 및 O-결합형 글리코콘주게이트와 글리콜리피드의 말단 푸코스 잔기를 가수분해하여 제거함으로써 글리칸 분해 및 리모델링에 기여한다. 세포 표면 및 세포외기질 단백질의 푸코실화 상태를 조절함으로써 FUCA2는 수용체 턴오버, 세포–세포 접착, 면역 관련 글리칸 신호전달과 같은 과정에 영향을 줄 수 있다. 푸코스 대사와 푸코시다아제 활성의 변화는 염증 반응의 변화 및 종양 관련 당화 패턴과 연관되어 왔으며, 그로 인해 FUCA2는 글라이코믹스 기반 표현형을 탐구하는 데 유용한 핵심 지점으로 여겨진다. 기능 연구는 흔히 FUCA2 의존적 탈푸코실화가 단백질 수송, 리소좀 기능, 그리고 당단백질 매개 신호전달 경로에 어떤 영향을 미치는지에 초점을 맞춘다.

FUCA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FUCA2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FUCA2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FUCA2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FUCA2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FUCA2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FUCA2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FUCA2 기능에 중요한 FUCA2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FUCA2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FUCA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FUCA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FUCA2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FUCA2 HDR 플라스미드 (h) 및 FUCA2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FUCA2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FUCA2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.