frizzled-7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420437-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- frizzled-7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase frizzled-7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase frizzled-7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Fzd7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
frizzled-7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420437-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Fzd7 de camundongo codifica a frizzled-7, um receptor de WNT com sete domínios transmembrana que coordena a sinalização dependente de ligante por meio da via canônica de transcrição β-catenina/TCF e das vias não canônicas de polaridade planar celular e WNT/Ca²⁺. Ao regular decisões de destino celular, proliferação, polaridade e migração, a frizzled-7 contribui para o padrão embrionário e para a homeostase de tecidos adultos, incluindo a manutenção de células-tronco e progenitoras. Alterações na sinalização mediada por Fzd7 têm sido associadas à desregulação da atividade da via WNT observada em modelos de oncogênese, fibrose e remodelamento tecidual inflamatório, nos quais mudanças no output de β-catenina e na dinâmica do citoesqueleto podem influenciar fenótipos relevantes para a doença. Assim, Fzd7 é amplamente estudado em vias que regem a organização epitelial, respostas regenerativas e a comunicação cruzada de sinalização dependente do nicho.
frizzled-7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Fzd7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Fzd7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Fzd7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Fzd7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.