Flt-3/Flk-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400218-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Flt-3/Flk-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Flt-3/Flk-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Flt-3/Flk-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FLT3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Flt-3/Flk-2 Anticorpo (SF1.340): sc-19635
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Flt-3/Flk-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400218-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Flt-3/Flk-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400218-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FLT3 (Flt-3/Flk-2) codifica uma tirosina-quinase receptora de classe III, expressa predominantemente em progenitores hematopoiéticos, na qual a dimerização induzida pelo ligante desencadeia a autofosforilação e a sinalização a jusante. O FLT3 ativado aciona as vias PI3K–AKT, RAS–MAPK e JAK–STAT para regular a proliferação, a sobrevivência e a diferenciação durante a hematopoiese inicial e o desenvolvimento de células dendríticas. A sinalização desregulada de FLT3, incluindo ativação aberrante e expressão alterada, está fortemente associada à biologia das malignidades mieloides e a fenótipos de células-tronco/progenitoras leucêmicas, tornando-o um alvo amplamente estudado em redes de sinalização oncogênica. O FLT3 também serve como receptor modelo para investigar o tráfego de RTKs, o controle por retroalimentação e o crosstalk entre vias em contextos mediados por citocinas.
Flt-3/Flk-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FLT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FLT3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FLT3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FLT3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.