FLRT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406632

概要

FLRT3（fibronectin leucine rich transmembrane protein 3）は、発生過程において細胞接着およびガイダンスキューとして機能する一回膜貫通型膜タンパク質をコードし、細胞間相互作用や神経突起伸長を協調的に制御します。FLRT3は、FGF受容体経路やUNC5受容体などの細胞外ガイダンスリガンドが関与するシグナル伝達ネットワークに参加し、接着、反発、組織パターニングに影響を与えます。これらの相互作用を通じて、FLRT3は複数の組織コンテキストにおける細胞遊走、シナプス形成、形態形成の制御に寄与します。FLRT3の発現変化や経路接続性の変動は、神経発生過程やがん生物学の研究で報告されており、接着および遊走研究における機構的ノードとしての有用性が示唆されています。

FLRT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFLRT3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FLRT3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FLRT3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FLRT3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FLRT3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FLRT3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FLRT3の機能に不可欠なFLRT3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FLRT3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FLRT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFLRT3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FLRT3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FLRT3 HDRプラスミド（h）および FLRT3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFLRT3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFLRT3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。