FIP1L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-413438-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FIP1L1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FIP1L1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FIP1L1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FIP1L1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FIP1L1 Anticorpo (C-10): sc-398392
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FIP1L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-413438-NIC | 20 µg | $410.00 |
FIP1L1 codifica uma subunidade central do complexo fator de especificidade de clivagem e poliadenilação (CPSF), que participa do processamento da extremidade 3′ de pré-mRNAs, incluindo a seleção do sítio de poli(A) e o acoplamento da clivagem à poliadenilação. Por meio de interações com a poli(A) polimerase e outros fatores de processamento, a FIP1L1 ajuda a moldar a diversidade de isoformas de transcritos e a estabilidade do mRNA, influenciando assim programas de expressão gênica ligados à proliferação e à diferenciação. A desregulação do processamento de RNA mediado por FIP1L1 é relevante para a reprogramação transcricional oncogênica, e rearranjos cromossômicos envolvendo FIP1L1 estão bem descritos em neoplasias mieloides como impulsionadores de sinalização quinase aberrante. Essas características tornam a FIP1L1 um ponto útil para estudar a formação da extremidade 3′ do RNA, a poliadenilação alternativa e as consequências a jusante para o estado celular.
FIP1L1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FIP1L1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FIP1L1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FIP1L1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FIP1L1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.