Fibromodulin Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401610-LAC

FMOD codifica a fibromodulina, um proteoglicano pequeno rico em leucina que é secretado para a matriz extracelular, onde se liga a colagénos e regula a fibrilogénese, a montagem da matriz e a mecânica dos tecidos. A fibromodulina modula a sinalização através de vias de fatores de crescimento, incluindo sinais da família TGF-β, influenciando programas de adesão celular, migração e diferenciação relevantes para a homeostase do tecido conjuntivo. Alterações na expressão de FMOD ou na sua localização na matriz têm sido associadas a fenótipos de remodelação observados em fibrose, osteoartrite e estroma associado a tumores, o que a torna um ponto de partida útil para estudar o comportamento celular impulsionado pela matriz extracelular. Como componente da matriz com interações regulatórias, a fibromodulina é frequentemente analisada em modelos de reparação de feridas, angiogénese e mecanotransdução.

As Partículas de Ativação Lentivirais Fibromodulin (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de FMOD numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Fibromodulin (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição FMOD, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Fibromodulin. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo FMOD e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.