Fibromodulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401610

概要

FMODは、コラーゲン線維に結合し、線維形成（フィブリロジェネシス）、マトリックス構築、組織の力学特性の制御に寄与する、細胞外マトリックス（ECM）の小型ロイシンリッチプロテオグリカンであるフィブロモジュリンをコードしている。フィブロモジュリンは、TGF-βファミリー経路との相互作用などを含む増殖因子シグナル伝達を調節し、接着、遊走、創傷修復プログラムに影響する細胞—マトリックス間コミュニケーションにも関与する。FMODの発現変化やECM構造の乱れは、複数の組織における線維化リモデリングや、制御不全の間質応答と関連づけられている。コラーゲン沈着やシグナル因子の利用可能性に影響するマトリックス成分として、FMODは結合組織生物学、炎症に伴うリモデリング、腫瘍微小環境研究でしばしば検討されている。

Fibromodulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFMOD遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FMOD内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FMODのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Fibromodulinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Fibromodulinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FMOD欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Fibromodulinの機能に不可欠なFMODエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FMODゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Fibromodulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFibromodulin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FMOD遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Fibromodulin HDRプラスミド（h）および Fibromodulin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFMODホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFMOD標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。