FHOD3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-432529

개요

Fhod3는 선형 액틴 필라멘트를 핵화하고 신장시키는 diaphanous 관련 formin인 FHOD3를 암호화하며, 액틴 세포골격의 재구성과 수축성 구조의 조직화를 지원합니다. 마우스의 횡문근에서 FHOD3는 근절(sarcomere) 구조에 풍부하게 존재하고, Rho GTPase에 의해 조절되는 액틴 역학을 통해 근원섬유(myofibril) 조립, 스트레스 섬유 형성, 그리고 세포 구조의 유지에 기여합니다. 이러한 과정은 기계적 신호전달(mechanotransduction), 세포 형태, 세포 내 힘 전달을 조절하는 경로들과 교차하므로, FHOD3는 세포골격 항상성 연구를 위한 유용한 핵심 지점(node)이 됩니다. 액틴 조직화 및 근절 무결성의 이상은 심근병증과 근육 기능장애 표현형과 연관되어 있어, Fhod3는 in vitro에서 구조적 심장·근육 질환 기전을 모델링하는 데 관련성 높은 표적입니다.

FHOD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Fhod3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Fhod3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Fhod3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FHOD3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FHOD3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Fhod3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FHOD3 기능에 중요한 Fhod3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Fhod3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FHOD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 FHOD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Fhod3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FHOD3 HDR 플라스미드 (m) 및 FHOD3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Fhod3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Fhod3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.