FcRH1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432859

Descripción general

Fcrl1 codifica el receptor tipo Fc 1 (FcRH1), un receptor inmunorregulador asociado a células B que participa en el ajuste de la señalización impulsada por el receptor de antígeno y de los programas de activación posteriores. En tejidos linfoides de ratón, la expresión de FcRH1 se relaciona con estados de diferenciación de las células B y con la modulación de eventos de señalización tempranos que se entrecruzan con vías que controlan el flujo de calcio, la actividad de MAPK y las respuestas transcripcionales tras la activación del BCR. Al influir en los umbrales de activación y supervivencia de las células B, Fcrl1 ofrece un punto de entrada funcional para estudiar la dinámica del centro germinal, la tolerancia inmunitaria y los mecanismos que configuran las respuestas de anticuerpos. Las redes de señalización de receptores tipo Fc desreguladas se analizan con frecuencia en el contexto de fenotipos aberrantes de células B y patologías asociadas al sistema inmune, lo que respalda la relevancia de Fcrl1 para la investigación en inmunología mecanística.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FcRH1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Fcrl1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Fcrl1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Fcrl1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FcRH1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Fcrl1 para la investigación de la señalización de FcRH1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Fcrl1 críticos para la función de FcRH1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Fcrl1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FcRH1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FcRH1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Fcrl1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FcRH1 (m) y el plásmido HDR FcRH1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Fcrl1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Fcrl1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.