FBXO29 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-433093

개요

Fbxw8는 F-box 단백질인 FBXO29를 암호화하며, FBXO29는 특정 단백질을 유비퀴틴화 및 프로테아좀 분해로 유도하는 SKP1–CUL1–F-box(SCF) E3 유비퀴틴 리가아제 복합체의 기질(서브스트레이트) 인식 구성요소입니다. 신호전달 및 세포주기 조절 인자들의 조절된 분해를 통해 FBXO29는 단백질 항상성, 증식, 분화 프로그램의 조절에 기여합니다. 유비퀴틴 의존적 품질 관리의 일부로서 SCF형 리가아제는 성장인자 신호전달과 스트레스 반응을 형성하는 경로들과 맞물려 작동하므로, Fbxw8의 교란은 암 및 기타 증식성 또는 발달성 질환에서 관찰되는 단백질 항상성 이상(프로테오스타시스 이상) 기전을 연구하는 데 의미가 있습니다. 따라서 마우스 Fbxw8 모델은 유비퀴틴 리가아제의 기질 네트워크와 그것이 세포 표현형에 미치는 영향을 규명하는 데 유용합니다.

FBXO29 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Fbxw8 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Fbxw8 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Fbxw8의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FBXO29 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FBXO29 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Fbxw8 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FBXO29 기능에 중요한 Fbxw8 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Fbxw8 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FBXO29 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 FBXO29 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Fbxw8 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FBXO29 HDR 플라스미드 (m) 및 FBXO29 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Fbxw8 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Fbxw8 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.