FBXO10 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-406159-NIC

FBXO10은 SKP1–CUL1–F-box(SCF) E3 유비퀴틴 리가아제 복합체에서 F-box 기질 수용체를 암호화하며, 특정 단백질을 유비퀴틴화 및 프로테아좀 의존적 분해 경로에 연결합니다. 신호전달 인자와 세포 운명 결정 인자의 조절된 분해를 통해 FBXO10은 아폽토시스, 단백질 항상성, 그리고 하위 스트레스 반응 경로의 조절에 기여합니다. FBXO10의 기능 또는 발현 변화는 생존 신호의 조절 이상과 연관되어 왔으며, 유비퀴틴 매개 단백질 항상성이 흔히 교란되는 림프계 악성종양의 생물학적 맥락에서 연구되어 왔습니다. 그 결과 FBXO10은 유비퀴틴–프로테아좀 경로의 구성과 그 경로가 세포 적합도 및 분화 프로그램에 미치는 영향을 규명하는 데 유용한 표적입니다.

FBXO10 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 FBXO10 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 FBXO10 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 FBXO10의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, FBXO10 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.