FAS CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420287

개요

Fas는 TNF 수용체 슈퍼패밀리에 속하는 사멸 수용체인 FAS(CD95/APO-1)를 암호화하며, FAS 리간드가 결합하고 이어서 사멸 유도 신호복합체(DISC)가 형성되면 외인성 세포사멸(apoptosis)을 개시합니다. 이 신호 연쇄 반응은 FADD를 모집하고 CASP8/CASP10을 활성화하여 하위 단계의 효과기 카스파아제들과 연결되며, 세포 환경에 따라 미토콘드리아성 세포사멸 경로 및 NF-κB 연관 생존 프로그램과도 교차합니다. 마우스의 면역 항상성에서 FAS 매개 활성화 유도 세포사멸은 림프구의 과도한 증식을 억제하고 말초 관용을 유지하는 데 기여합니다. Fas/FAS 신호가 조절 이상을 보이면 세포사멸 결함, 만성 면역 활성화, 림프증식, 그리고 염증 모델에서 조직 손상 반응의 변화와 연관됩니다.

FAS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Fas 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Fas 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Fas의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FAS 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FAS 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Fas 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FAS 기능에 중요한 Fas 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Fas 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FAS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 FAS CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Fas 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FAS HDR 플라스미드 (m) 및 FAS HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Fas 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Fas 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.