FANCI 렌티바이러스의 활성화 입자 (h): sc-402229-LAC
- Target species: human
- 200 µl of transduction-ready, high-titer CRISPR/dCas9 Lentiviral Activation Particles
- FANCI Lentiviral Activation Particles (h) 는 synergistic activation mediator (SAM) transcription activation system으로 세포에 대한lentiviral transduction을 통해 특정유전자 발현을 upregulate하도록 디자인되였습니다.
- FANCI Lentiviral Activation Particles (h) 은 아래의 SAM Activation elements를 포함하고 있습니다: transactivation domain VP64과 융합된 deactivated Cas9 (dCas9) 뉴클리아제 (D10A and N863A),MS2-p65-HSF1융합 프로틴과 타깃특정 20 nt guide RNA. 또한 각각 blasticidin, hygromycin 과 puromycin resistance genes를 포함하고있습니다.
- SAM complex는 transduction후 transcriptional start site상류의 약 200-250 nt의 특정위치에 바인딩하여 고효율gene activation에 필요한 transcription factor을 증가시킵니다.
- FANCI 렌티바이러스 활성화 플라스미드 (h) 및 FANCI 렌티바이러스 활성화 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FANCI 프로모터의 서로 다른 조절 영역을 표적으로 합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 사용할 수 있습니다
- Transfection, gene activation효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 FANCI Antibody (A-7): sc-271316
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
FANCI 렌티바이러스의 활성화 입자 (h) | sc-402229-LAC | 200 µl | $455.00 |
인간 FANCI 유전자는 DNA 복제 동안 게놈 무결성을 보호하는 판코니 빈혈(FA) DNA 복구 네트워크의 핵심 구성요소를 암호화한다. FANCI는 FANCD2와 함께 ID2 복합체를 형성하며, ATR 의존적 인산화와 FA 코어 복합체 매개 단일 유비퀴틴화(monoubiquitination)를 거친다. 이를 통해 하위 뉴클레이스와 상동 재조합 인자들이 모집되어 DNA 가닥간 교차결합(interstrand crosslink)과 정지된 복제 포크를 해결한다. 복제 포크 보호, S기 체크포인트 신호전달, 복구 조정에서의 역할을 통해 FANCI 기능 이상은 염색체 불안정성과 연관되며, 판코니 빈혈 및 관련 암 소인 증후군의 병태생리에 연결된다. 기전 연구에서의 지표로는 ID2 단일 유비퀴틴화, RAD51 포커스 형성, 그리고 교차결합 유발제에 대한 민감도를 통해 FANCI 활성을 모니터링할 수 있다.
FANCI 렌티바이러스 활성화 입자(h)는 완전한 시너지 활성화 매개체(SAM) 전사 활성화 시스템을 전달 준비가 된 고역가 렌티바이러스 입자에 포장함으로써 이러한 요구를 충족시키며, 더 광범위한 인간 세포 유형에서 효율적인 FANCI 발현 증가를 가능하게 합니다.
FANCI 렌티바이러스 활성화 입자(h)는 렌티바이러스 전이를 통해 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템의 모든 기능적 구성 요소를 전달합니다. 이 시스템은 표적 세포로 공동 전달되는 세 가지 입자 제제로 구성됩니다: 하나는 촉매 활성이 없는 dCas9(D10A 및 N863A 돌연변이)을 VP64 전사 활성화 도메인과 결합시킨 형태로, 블라스티시딘 내성 유전자를 포함하며; 하나는 히그로마이신 저항성 유전자와 융합된 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며; 또 하나는 푸로마이신 저항성 유전자와 융합된 두 개의 MS2 RNA 아파타머에 표적 특이적 20 nt sgRNA가 융합된 것을 암호화합니다. 렌티바이러스 매개 전달 및 발현 카세트의 게놈 통합 후, SAM 구성 요소들은 안정적으로 발현되며 FANCI 전사 개시점 상류의 근위 프로모터 영역 내 표적 부위에 집합합니다. 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1은 협력하여 내인성 전사 기구를 모집하고 내인성 FANCI 발현의 지속적인 상향 조절을 유도합니다. 뉴클레아제 비활성 dCas9을 사용함으로써 이중 가닥 DNA 절단이 발생하지 않으며, FANCI의 본래 게놈 위치와 조절 구조를 보존할 수 있습니다.
렌티바이러스 형식은 몇 가지 실질적인 이점을 제공합니다: 안정적인 게놈 통합은 세포 분열을 통한 유전적 활성화를 지원하며, 고역가 입자 제제는 자체 바이러스 생산의 필요성을 없애고, 1차 세포, 비분열 세포 및 형질 도입 저항성 세포 유형과의 호환성은 실험적 접근성을 확대합니다. 성공적인 전이는 푸로마이신, 하이그로마이신, 블라스티시딘을 이용한 삼중 항생제 선별을 통해 확인하고 증폭할 수 있습니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.