FAM123A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404231

개요

AMER2(FAM123A)는 Wnt/β-카테닌 신호전달과 세포 극성 관련 과정의 조절에 관여하는 세포질 단백질로, 막 근처에서 전달되는 신호를 증식과 분화에 영향을 미치는 하위 전사 프로그램과 연결합니다. β-카테닌 조절 네트워크의 구성요소를 조절함으로써 FAM123A는 세포 접착과 세포골격 조직에 영향을 줄 수 있으며, 그 결과 상피 조직의 구조에도 영향을 미칠 잠재성이 있습니다. Wnt 경로 활성의 변화는 발생생물학과 종양성 형질전환 전반에 걸쳐 폭넓게 중요한 의미를 가지므로, AMER2는 신호 상태 의존성을 분석하는 데 유용한 출발점이 됩니다. AMER2/FAM123A에 대한 연구는 경로 간 크로스토크의 기전 연구, 맥락(컨텍스트) 특이적 전사 출력, 그리고 인간 세포 모델에서의 유전자형–표현형 관계를 규명하는 연구를 뒷받침합니다.

FAM123A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 AMER2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 AMER2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 AMER2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FAM123A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FAM123A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 AMER2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FAM123A 기능에 중요한 AMER2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 AMER2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FAM123A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FAM123A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 AMER2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FAM123A HDR 플라스미드 (h) 및 FAM123A HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 AMER2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 AMER2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.