Factor IX CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402469

개요

인간 F9 유전자는 혈액 응고의 내인성 경로에서 작용하는 비타민 K 의존성 세린 프로테아제 전효소(zymogen)인 응고 인자 IX를 암호화하며, 이는 활성화되어 인자 IXa가 됩니다. 인자 VIIIa와 함께 인지질 표면에서 복합체를 형성한 인자 IXa는 인자 X의 활성화를 촉매하여 트롬빈 생성과 피브린 혈전 형성을 촉진합니다. F9의 활성은 번역 후 γ-카복실화와 칼슘 의존적 막 결합에 의해 조절되며, 이는 간에서의 단백질 가공 과정 및 세포외 단백질분해 연쇄반응과의 연관성을 보여줍니다. F9의 기능 장애 또는 기능적 결핍은 유전성 출혈 표현형과 관련되어 있으며, 응고 네트워크 조절과 프로테아제–보조인자 상호작용을 이해하기 위해 F9는 일상적으로 연구됩니다.

Factor IX CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 F9 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 F9 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 F9의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Factor IX 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Factor IX 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 F9 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Factor IX 기능에 중요한 F9 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 F9 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Factor IX CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Factor IX CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 F9 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Factor IX HDR 플라스미드 (h) 및 Factor IX HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 F9 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 F9 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.