



주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Exo70 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-424708-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Exo70 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2) | sc-424708-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Exoc7는 극성(exocyst) 복합체(exocyst complex)를 이루는 8개 소단위 중 핵심 소단위인 Exo70을 암호화하며, 분비 소낭을 특정 세포막 위치에 결박(tethering)하여 극성 외배출(polarized exocytosis)이 가능하도록 한다. 마우스 세포에서 Exo70은 소낭 도킹을 액틴 세포골격 재구성 및 소형 GTPase 신호전달 경로와 조율함으로써, 상피 극성, 신경돌기(outgrowth) 형성, 세포질분열(cytokinesis), 방향성 세포 이동에 필요한 막 수송 과정을 지원한다. Exocyst 의존적 수송은 수용체 재활용과 접착 분자의 세포표면 전달에 영향을 미쳐, Exo70의 기능을 세포 형태, 침윤, 조직 형태형성(morphogenesis)을 조절하는 경로와 연결한다. Exocyst 구성요소의 조절 이상은 비정상적인 세포 운동성과 발달 결함과 연관되어 있어, Exoc7는 수송 구동(trafficking-driven) 표현형의 기전을 연구하는 데 유용한 표적이 된다.
Exo70 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Exoc7 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Exoc7 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Exoc7의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Exoc7 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
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