Date published: 2026-8-6

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Erythropoietin/EPO Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400283-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • Erythropoietin/EPOO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase Erythropoietin/EPO (h) e o Plasmídeo Double Nickase Erythropoietin/EPO (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPO. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Erythropoietin/EPO Anticorpo (7D10): sc-80995
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    Erythropoietin/EPO Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-400283-NIC
    20 µg
    $410.00

    Erythropoietin/EPO Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-400283-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O EPO humano codifica a eritropoietina, um hormônio glicoproteico secretado que regula a sobrevivência, a proliferação e a diferenciação de progenitores eritroides por meio do engajamento do EPOR e da sinalização a jusante JAK2/STAT5. Essa via integra-se às cascatas PI3K–AKT e MAPK para coordenar programas antiapoptóticos e a produção eritropoiética sob estresse hipóxico, incluindo o controle transcricional por fatores HIF. Além da hematopoiese, a sinalização EPO/EPOR é usada para investigar a biologia de receptores de citocinas, redes transcricionais de resposta ao estresse e a dinâmica de fatores secretados na comunicação entre células. A expressão ou a sinalização de EPO desreguladas são frequentemente estudadas no contexto da biologia da anemia, do remodelamento associado à hipóxia e da adaptação do microambiente tumoral, em que vias de sensoriamento de oxigênio estão alteradas.

    Erythropoietin/EPO O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPO em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPO. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPO. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPO interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.