ERK 5 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400891-LAC

MAPK7 codifica a ERK5, uma quinase MAP atípica ativada a jusante de MEK5, que integra sinais mitogênicos e de estresse para regular a transcrição, a proliferação, a diferenciação e a sobrevivência celular. A sinalização de ERK5 interage com cascatas de MAPK e modula a atividade de fatores de transcrição como o MEF2, moldando programas ligados à remodelação do citoesqueleto, à migração e a respostas angiogênicas. A atividade desregulada da via MAPK7/ERK5 tem sido associada a alterações no controle do crescimento e na sinalização inflamatória em múltiplos contextos relevantes para doenças, incluindo modelos de biologia oncogênica e vascular. Como resultado, MAPK7 serve como um nó útil para dissecar o crosstalk entre vias, a expressão gênica dependente de estímulo e dinâmicas adaptativas de sinalização em células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais ERK 5 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de MAPK7 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais ERK 5 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição MAPK7, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ERK 5. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo MAPK7 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.