ErbB3/HER3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420219-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ErbB3/HER3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ErbB3/HER3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ErbB3/HER3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Erbb3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ErbB3/HER3 Anticorpo (G-4): sc-7390
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ErbB3/HER3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420219-NIC | 20 µg | $410.00 |
Erbb3 codifica o receptor tirosina-quinase ErbB3/HER3, um membro da família EGFR/ErbB que atua principalmente por meio de heterodimerização com quinases como a ERBB2 para iniciar a sinalização a jusante. Apesar de sua atividade quinase intrínseca limitada, o ErbB3 oferece múltiplos motivos de ligação à PI3K e é um nó-chave na regulação das vias PI3K–AKT e MAPK, influenciando proliferação, sobrevivência, diferenciação e o desenvolvimento epitelial em tecidos de camundongo. O engajamento por ligantes (por exemplo, neuregulinas) e o crosstalk entre receptores moldam as respostas celulares, tornando o Erbb3 um foco mecanístico frequente em estudos de integração da sinalização por receptores. A sinalização desregulada de ErbB3/HER3 é frequentemente investigada no remodelamento de vias oncogênicas, na sinalização adaptativa à terapia e em fenótipos de desenvolvimento relevantes para modelos de doença.
ErbB3/HER3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Erbb3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Erbb3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Erbb3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Erbb3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.