ER81 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401594-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ER81O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ER81 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ER81 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ETV1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ER81 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401594-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ER81 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401594-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ETV1 codifica o fator de transcrição da família ETS ER81, uma proteína de ligação ao DNA específica de sequência que coordena programas de expressão gênica que controlam decisões de destino celular, proliferação e diferenciação. ER81 integra sinais das vias MAPK/ERK e de receptores tirosina-quinase para modular saídas transcricionais envolvidas no desenvolvimento neuronal e no padrão de formação dos tecidos. A atividade desregulada de ETV1 tem sido associada a redes transcricionais oncogênicas, incluindo fusões gênicas e expressão aberrante dirigida por enhancers em múltiplos contextos tumorais, tornando-o um modelo amplamente utilizado para estudar programas de linhagem e transcrição dependente de sinalização. Em células humanas, a regulação dos alvos de ER81 fornece uma leitura experimental tratável para investigar a seleção de promotores/enhancers mediada por ETS, o recrutamento de cofatores e o controle transcricional dependente da cromatina.
ER81 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ETV1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ETV1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ETV1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ETV1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.