Plásmido Doble Nickase (h) Epiregulin: sc-404273-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Epiregulin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Epiregulin (h) y el plásmido de doble nickasa Epiregulin (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EREG. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Epiregulin | sc-404273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Epiregulin | sc-404273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EREG codifica epiregulina, un ligando secretado de la familia EGF que activa la señalización de EGFR/ERBB para regular la proliferación, migración y diferenciación de células epiteliales y del estroma. La unión de la epiregulina a receptores tirosina cinasa promueve la actividad de las vías MAPK/ERK y PI3K/AKT aguas abajo, influyendo en la progresión del ciclo celular y en programas de supervivencia. La expresión aberrante de EREG se ha asociado con respuestas inflamatorias desreguladas, fenotipos de reparación de heridas y contextos de señalización oncogénica en los que la remodelación de la vía de EGFR contribuye al crecimiento tumoral, la invasión y la comunicación cruzada con el microambiente. Como modulador a nivel de ligando del output de la red ERBB, EREG se estudia con frecuencia en modelos de biología epitelial, señalización impulsada por citocinas y dependencias de vías asociadas al cáncer.
Epiregulin El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EREG en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EREG. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EREG. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EREG alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.