EphB2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420199

개요

Ephb2는 인접한 세포들 사이의 접촉 의존적 소통을 매개하는 ephrin–Eph 신호전달계의 수용체 티로신 키나아제인 EphB2를 암호화합니다. 막에 결합된 ephrin-B 리간드와 결합하면 EphB2는 양방향 신호전달을 유도하여 세포골격 재구성, 세포 접착, 방향성 이동을 조절하며, 특히 축삭 유도, 시냅스 조직화, 조직 경계 형성에서 중요한 역할을 합니다. 마우스 모델에서 EphB2 의존적 신호는 신경 회로의 조립과 혈관 패터닝에 영향을 미치며, 세포 위치 변화 및 침습적 행동 변화와 관련된 표현형과 연관되어 왔습니다. EphB2 활성이 비정상적으로 조절되는 경우는 발달 결함 및 운동성과 구획화(compartmentalization)를 제어하는 암 관련 경로의 맥락에서 자주 연구됩니다.

EphB2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ephb2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ephb2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ephb2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EphB2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EphB2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ephb2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EphB2 기능에 중요한 Ephb2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ephb2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EphB2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 EphB2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ephb2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EphB2 HDR 플라스미드 (m) 및 EphB2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ephb2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ephb2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.