Endothelial Lipase CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406307

概要

LIPGは、血管内皮で発現する分泌型ホスホリパーゼA1である内皮リパーゼ（EL）をコードしており、循環中のHDLに含まれるリン脂質を加水分解し、リポタンパク質のリモデリングやコレステロール輸送を調節します。ELはHDLの分解代謝およびリン脂質のターンオーバーを制御することで血管の脂質恒常性に影響を与え、内皮細胞やマクロファージにおける炎症シグナル伝達とも関わります。LIPGの活性や発現の変化は、脂質異常症に関連する表現型や、内皮機能障害および脂質駆動性の血管炎症など、動脈硬化に関わるプロセスと関連づけられています。さらにLIPGは、LPLや肝性リパーゼといった細胞外リパーゼネットワークに与える影響や、脂質メディエーター産生への作用の観点からも研究されています。

Endothelial Lipase CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLIPG遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LIPG内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LIPGのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Endothelial Lipaseタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Endothelial Lipaseシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LIPG欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Endothelial Lipaseの機能に不可欠なLIPGエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LIPGゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Endothelial Lipase CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびEndothelial Lipase CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LIPG遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Endothelial Lipase HDRプラスミド（h）および Endothelial Lipase HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLIPGホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLIPG標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。