EMBP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422395

개요

Prg2는 호산구 주요 염기성 단백질(eosinophil major basic protein, EMBP)을 암호화하며, EMBP는 호산구에서 발현되는 강한 양전하성 과립 단백질로서 점막 및 염증 부위에서 선천면역 효과 기능에 기여합니다. 탈과립(degranulation) 시 EMBP는 음전하를 띤 세포막과 세포외기질 성분에 결합할 수 있어, 상피 장벽의 무결성, 세포독성 반응, 조직 재형성에 영향을 미칩니다. EMBP의 활성은 호산구 활성화, 백혈구 유입, 염증성 신호전달을 조절하는 경로들과 교차하므로, Prg2는 알레르기성 염증과 기도 질환 모델에서 유용한 표지자이자 기전적 허브로 활용됩니다. 마우스 시스템에서는 Prg2를 교란함으로써 만성 염증 표현형과 관련된 호산구 주도의 면역병리 및 숙주–조직 상호작용을 분석하는 데 도움이 됩니다.

EMBP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Prg2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Prg2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Prg2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EMBP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EMBP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Prg2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EMBP 기능에 중요한 Prg2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Prg2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EMBP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 EMBP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Prg2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EMBP HDR 플라스미드 (m) 및 EMBP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Prg2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Prg2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.