elastin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-400640-KO-2

개요

인간 ELN 유전자는 엘라스틴(elastin)을 암호화하며, 엘라스틴은 동맥, 폐, 피부의 탄성 섬유에 탄력성과 복원력을 부여하는 고도로 가교된 세포외기질 단백질입니다. 엘라스틴 조립은 미세섬유성 스캐폴드와 lysyl oxidase 매개 가교 결합을 통해 이루어지며, 이는 혈관 순응도와 조직 역학을 지지하고, 기질–인테그린(matrix–integrin) 신호 및 기계적 신호전달(mechanotransduction) 경로를 통해 세포 행동에도 영향을 미칩니다. ELN의 교란은 탄성 섬유 형성과 세포외기질 항상성을 방해하여 평활근 세포 표현형과 결합조직 구조를 변화시킵니다. ELN 기능 이상은 상행대동맥 판막상 협착(supravalvular aortic stenosis), 피부이완증(cutis laxa) 및 기타 엘라스틴 관련 동맥병증을 포함한 혈관 및 결합조직의 구조적 완전성 장애 질환과 연관됩니다.

elastin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 ELN 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ELN 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ELN의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 elastin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 elastin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ELN 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• elastin 기능에 중요한 ELN 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ELN 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• elastin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 elastin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ELN 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  elastin HDR 플라스미드 (h) 및 elastin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ELN 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ELN 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.