eIF5A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401820-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF5AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF5A (h) e o Plasmídeo Double Nickase eIF5A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF5A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF5A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401820-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF5A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401820-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF5A codifica o fator eucariótico de iniciação da tradução 5A (eIF5A), uma proteína de ligação a RNA altamente conservada que é ativada por hipusinação e favorece o alongamento produtivo da tradução, particularmente ao atravessar motivos ricos em poliprolina. O eIF5A influencia a estabilidade/turnover de mRNAs e a dinâmica dos ribossomos, conectando-o à proteostase, à progressão do ciclo celular e a programas de adaptação ao estresse. Por meio dessas funções, o EIF5A participa de vias que modulam proliferação, apoptose e os desfechos da sinalização inflamatória. A desregulação da atividade do eIF5A ou do circuito de hipusinação tem sido associada a alterações no controle de crescimento e à remodelação translacional observadas no câncer e em outros contextos de doenças proliferativas ou relacionadas ao estresse.
eIF5A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF5A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF5A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF5A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF5A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.