eIF4H CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-411056

개요

EIF4H는 인간 eIF4H 번역 개시 인자를 암호화하며, eIF4A와 협력해 ATP 의존적 RNA 헬리케이스 활성을 촉진하고 캡 의존적 번역 개시 과정에서 구조화된 5′ UTR을 따라 스캐닝이 진행되도록 돕는 보조 단백질이다. eIF4H는 리보솜 모집과 mRNA별 번역 효율을 조절함으로써 성장 신호와 세포 스트레스에 대한 반응에 따라 단백질체(proteome) 산출을 형성하는 데 기여하며, EIF4H 기능을 증식, 분화 및 스트레스 적응 프로그램의 조절과 연결한다. eIF4H를 포함한 번역 개시 구성요소의 조절 이상은 종양유전자 및 생존 경로의 발현 변화와 연관된 것으로 보고되었고, 종양 생물학, 신경생물학, 바이러스–숙주 번역 조절 같은 맥락에서 자주 연구된다. 따라서 EIF4H를 교란하는 것은 번역 조절 메커니즘과 그 하위 신호전달 결과를 분석하는 데 유용한 접근 지점을 제공한다.

eIF4H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 EIF4H 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 EIF4H 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 EIF4H의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 eIF4H 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 eIF4H 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 EIF4H 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• eIF4H 기능에 중요한 EIF4H 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 EIF4H 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• eIF4H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 eIF4H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 EIF4H 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  eIF4H HDR 플라스미드 (h) 및 eIF4H HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 EIF4H 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 EIF4H 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.