eIF4E3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407113

개요

EIF4E3는 5′ mRNA 캡을 인식하고 캡 의존적 번역 개시 조절에 기여하는 진핵생물 번역 개시 인자 4E(eIF4E) 패밀리의 구성원인 eIF4E3를 암호화합니다. 정형(canonical) eIF4E1과 비교해 eIF4E3는 흔히 비정형(noncanonical) 캡 결합 단백질로 설명되며, mRNA 선택적 번역 프로그램에 영향을 주어 단백질 항상성(proteostasis)과 스트레스 적응적 유전자 발현을 형성할 수 있습니다. 번역 조절에 미치는 영향으로 인해 eIF4E3는 mTOR 신호전달과 같은 성장 및 영양 감지 경로, 그리고 더 광범위한 RNA 대사 네트워크와도 교차합니다. 캡 의존적 번역의 조절 이상은 종양성 상태와 스트레스 반응 상태에서 반복적으로 관찰되는 특징이므로, EIF4E3는 질환 관련 세포 모델에서 번역 재배선(translational rewiring)의 기전을 연구하는 데 유용한 표적입니다.

eIF4E3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 EIF4E3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 EIF4E3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 EIF4E3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 eIF4E3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 eIF4E3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 EIF4E3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• eIF4E3 기능에 중요한 EIF4E3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 EIF4E3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• eIF4E3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 eIF4E3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 EIF4E3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  eIF4E3 HDR 플라스미드 (h) 및 eIF4E3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 EIF4E3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 EIF4E3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.