Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF4E 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-420148-NIC
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- eIF4E Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- eIF4E 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 eIF4E 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 Eif4e을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 eIF4E Antibody (P-2): sc-9976
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
eIF4E 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-420148-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF4E 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2) | sc-420148-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
마우스 Eif4e 유전자는 eIF4F 번역 개시 복합체의 캡 결합 소단위인 eIF4E를 암호화하며, eIF4E는 7-메틸구아노신(7-methylguanosine) 캡을 인식해 mRNA로의 리보솜 모집을 촉진합니다. eIF4E 활성은 mTORC1–4E-BP 조절을 통해 영양분 및 성장인자 신호를 통합하고, MAPK/MNK 의존적 인산화와 협력하여 증식, 대사, 스트레스 반응에 관여하는 전사체들의 선택적 번역을 정교하게 조율합니다. eIF4E의 발현량 또는 조절 이상은 번역 프로그램의 재편성과 세포 성장 프로그램의 이상 조절과 연관되어 있어, Eif4e는 암 생물학 및 발달 표현형에서 전사 후 조절을 연구하기 위한 핵심 노드로 여겨집니다. 마우스 모델에서 Eif4e를 교란하면 캡 의존적 번역, 단백질 항상성(proteostasis), 그리고 신호 전달과 결합된 유전자 발현을 기전적으로 규명하는 데 도움이 됩니다.
eIF4E 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Eif4e 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Eif4e 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Eif4e의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Eif4e 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.