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eIF4AIII双切口酶质粒(h) | sc-402660-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF4AIII双切口酶质粒(h2) | sc-402660-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF4A3 编码 eIF4AIII,这是一种 DEAD-box RNA 解旋酶,也是外显子连接复合体(EJC)的核心组成部分,负责将 pre-mRNA 剪接与后续的 mRNA 输出、定位、翻译以及无义介导的 mRNA 降解(NMD)相耦联。eIF4AIII 以 ATP 依赖的方式夹持在 RNA 上,帮助界定剪接后的信使核糖核蛋白(mRNP)结构,并影响转录本监控与蛋白质组保真性。EIF4A3 功能或表达的改变与 RNA 加工程序失调有关,这些变化与神经发育表型以及癌症相关的基因表达改变相关。因此,EIF4A3 常被用于研究 RNA 代谢、全基因组范围的剪接结局以及应激响应的翻译调控等通路。
eIF4AIII 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EIF4A3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF4A3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EIF4A3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EIF4A3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。