eIF1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423216

개요

마우스 Eif1 유전자는 진핵 번역 개시 인자 1(eIF1)을 암호화하며, eIF1은 캡 의존적 번역 개시 과정에서 정확한 시작 코돈 선택을 촉진하는 43S 번역 전개시 복합체의 보존된 구성 요소입니다. eIF1은 스캐닝의 엄격성을 강화하고 40S 소단위체의 열린(open) 구조를 안정화함으로써 전반적인 단백질 합성과 프로테옴의 정확성(충실도)을 조절하는 데 기여합니다. 이러한 기능은 Eif1을 mRNA 선택적 개시를 통해 세포 성장, 스트레스 적응, 분화를 형성하는 번역 조절 프로그램과 연결합니다. 번역 개시의 정확성 붕괴는 단백질 항상성(proteostasis) 변화와 비정상적 성장 신호로 특징지어지는 질병 관련 상태 전반과 폭넓게 연관되어 있어, Eif1은 번역 조절 이상 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 지점이 됩니다.

eIF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Eif1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Eif1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Eif1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 eIF1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 eIF1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Eif1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• eIF1 기능에 중요한 Eif1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Eif1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• eIF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 eIF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Eif1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  eIF1 HDR 플라스미드 (m) 및 eIF1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Eif1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Eif1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.