Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
EED Plasmide Double Nickase (h): sc-401234-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EED Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il EED Double Nickase Plasmid (h) e il EED Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EED. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: EED Antibody (3B12): sc-293203
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
EED Plasmide Double Nickase (h) | sc-401234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EED Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EED codifica una componente fondamentale del Complesso Repressivo Polycomb 2 (PRC2), che si lega all’istone H3 trimetilato sulla lisina 27 (H3K27me3) e stimola in modo allosterico l’attività metiltransferasica di EZH2/EZH1, favorendo la propagazione di domini di cromatina repressiva. Attraverso il silenziamento genico dipendente da PRC2, EED contribuisce al mantenimento dell’identità cellulare, al controllo dei programmi trascrizionali dello sviluppo e alla regolazione della proliferazione e della differenziazione. L’alterazione di EED compromette la repressione epigenetica e può modificare vie che governano l’impegno di linea e l’organizzazione della cromatina. La deregolazione della funzione di PRC2/EED è implicata in numerosi tumori e disturbi dello sviluppo, rendendo EED un bersaglio comune negli studi sul controllo epigenetico e sulla repressione trascrizionale.
EED Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EED nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EED. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EED. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EED interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.