Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Ebi3: sc-401552-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Ebi3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ebi3 (h) y el plásmido de doble nickasa Ebi3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a EBI3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Ebi3 Anticuerpo (G-4): sc-166158
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Ebi3 | sc-401552-NIC | 20 µg | $410.00 |
EBI3 codifica el gen 3 inducido por el virus de Epstein–Barr (Ebi3), una subunidad de citocina secretada que forma heterodímeros con p28 para generar IL-27 y con p35 para generar IL-35, conectando la regulación inmunitaria innata y adaptativa. A través de la señalización de IL-27/IL-35, Ebi3 influye en programas transcripcionales mediados por JAK/STAT que moldean la diferenciación de linfocitos T, la producción de citocinas inflamatorias y la función de las células presentadoras de antígeno. La expresión alterada de EBI3 se ha asociado con respuestas inmunitarias desreguladas en contextos autoinmunes e inflamatorios, y se estudia con frecuencia en el marco de la inmunología tumoral y de la infección crónica. Estas propiedades hacen de EBI3 una diana útil para analizar los circuitos de citocinas y las vías inmunorreguladoras en modelos celulares humanos.
Ebi3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus EBI3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de EBI3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de EBI3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con EBI3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.