EAAT4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422986

개요

Slc1a6는 흥분성 아미노산 수송체 4(EAAT4)를 암호화하며, EAAT4는 고친화성 Na⁺ 의존성 글루타메이트 수송체로서 세포외 글루타메이트를 제거하고 시냅스에서 흥분독성(excitotoxic) 신호를 제한하는 데 기여합니다. 생쥐 중추신경계에서 EAAT4는 소뇌 푸르키네(Purkinje) 뉴런에 풍부하게 발현되며, 글루타메이트 흡수를 이온 기울기와 연동함으로써 시냅스 전달을 조절하여 뉴런의 흥분성과 가소성에 영향을 줍니다. EAAT4는 글루타메이트성 신경전달을 조절함으로써 시냅스 항상성, 칼슘 의존적 신호전달, 그리고 글루타메이트 조절 이상에 따른 신경염증 반응과 연관된 경로들과 맞물려 작동합니다. 글루타메이트 수송 능력의 변화는 소뇌 기능 이상 모델 및 흥분성 신호와 시냅스 무결성이 교란되는 보다 광범위한 신경퇴행 연관 표현형과 관련이 있습니다.

EAAT4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Slc1a6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Slc1a6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Slc1a6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EAAT4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EAAT4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Slc1a6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EAAT4 기능에 중요한 Slc1a6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Slc1a6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EAAT4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 EAAT4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Slc1a6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EAAT4 HDR 플라스미드 (m) 및 EAAT4 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Slc1a6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Slc1a6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.