EAAT2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422984

개요

Slc1a2는 흥분성 아미노산 수송체 2(EAAT2)를 암호화합니다. EAAT2는 주로 성상교세포에서 발현되는 고용량 Na⁺ 의존성 글루타메이트 수송체로, 시냅스의 글루타메이트를 제거해 흥분성 신경전달을 유지하고 흥분독성 스트레스를 예방합니다. EAAT2는 글루타메이트 흡수를 이온 구배와 연동하고, 글루타메이트–글루타민 회로를 통해 성상교세포–뉴런 간 대사적 결합을 지원함으로써 글루타메이트성 신호전달을 조절합니다. 세포외 글루타메이트 항상성을 조절함으로써 Slc1a2는 시냅스 가소성, 신경세포 생존, 그리고 신경망의 흥분성에 영향을 미칩니다. EAAT2의 기능 또는 발현 변화는 신경퇴행, 뇌전증, 신경염증과 관련된 기전과 연관되어 보고되어 왔으며, 이 때문에 Slc1a2는 중추신경계(CNS) 경로 연구에서 흔히 표적이 됩니다.

EAAT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Slc1a2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Slc1a2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Slc1a2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EAAT2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EAAT2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Slc1a2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EAAT2 기능에 중요한 Slc1a2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Slc1a2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EAAT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 EAAT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Slc1a2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EAAT2 HDR 플라스미드 (m) 및 EAAT2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Slc1a2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Slc1a2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.