Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420081-NIC

O gene Dvl2 de camundongo codifica a Dishevelled 2 (DVL2), uma proteína adaptadora citoplasmática que retransmite sinais de ligantes Wnt dos receptores Frizzled para efetores a jusante. A DVL2 integra programas transcricionais canônicos da via Wnt/β-catenina com vias não canônicas de polaridade celular planar e Wnt/Ca²⁺, influenciando a polaridade celular, a remodelagem do citoesqueleto, a migração e o padrão do desenvolvimento. Ao modular a saída dessas vias, a DVL2 contribui para o controle, dependente do contexto, da proliferação e da diferenciação, sendo amplamente estudada em morfogênese tecidual e biologia de células-tronco. A desregulação da sinalização Wnt–Dishevelled está implicada em defeitos congênitos do desenvolvimento e em reprogramações de sinalização associadas a doenças, sustentando investigações mecanísticas da regulação da via em modelos murinos.

Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dvl2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dvl2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dvl2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dvl2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.