dUTPase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405843

개요

DUT는 사람 dUTPase를 암호화하는 유전자로, dUTP를 dUMP와 피로인산으로 가수분해하는 핵심 뉴클레오타이드 대사 효소입니다. 이를 통해 세포 내 dUTP 풀을 낮게 유지하고, 티미딜레이트 생합성을 위한 기질을 공급합니다. dUTPase는 유전체 DNA에 유라실이 편입되는 것을 제한함으로써 복제 정확도와 유전체 안정성을 뒷받침하며, DNA에서 유라실을 제거하는 염기 절제 복구(base excision repair) 경로와 기능적으로 연계됩니다. DUT 활성의 변화는 복제 스트레스 반응과 DNA 손상 신호전달을 조절할 수 있는데, 이러한 과정은 증식성 질환이나 유전독성 스트레스에 노출된 세포에서 흔히 교란됩니다. 피리미딘 항상성의 중심 축으로서 DUT는 세포주기 진행, 미토콘드리아 및 핵 DNA의 유지, 그리고 뉴클레오타이드 불균형에 의해 유도되는 돌연변이 형성과 관련해 폭넓게 연구되고 있습니다.

dUTPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DUT 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DUT 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DUT의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 dUTPase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 dUTPase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DUT 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• dUTPase 기능에 중요한 DUT 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DUT 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• dUTPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 dUTPase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DUT 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  dUTPase HDR 플라스미드 (h) 및 dUTPase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DUT 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DUT 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.