DUOX2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403534

개요

DUOX2(dual oxidase 2)는 상피세포의 첨단(apical) 표면에서 과산화수소를 생성하는 막 연관 NADPH 산화효소를 암호화하며, 과산화효소(peroxidase) 매개 반응과 산화환원(redox) 의존적 신호전달에 필요한 기질을 제공합니다. 점막 선천면역 방어의 일부로서 DUOX2 활성은 칼슘 신호, 사이토카인에 의해 유도되는 JAK/STAT 반응, 그리고 장벽 기능과 항균 프로그램을 형성하는 산화 스트레스 경로와 통합되어 조절됩니다. DUOX2 발현 또는 활성의 이상 조절은 염증성 장질환(IBD) 감수성, 만성 점막 염증, 숙주–미생물군집 상호작용의 변화와 연관된 것으로 보고되었고, 갑상선 호르몬 생성 및 상피성 발암의 맥락에서도 연구되고 있습니다. DUOX2 유래 ROS는 MAPK 및 NF-κB 신호를 조절할 수 있기 때문에, 상피 모델에서 증식, 분화, DNA 손상 반응에 미치는 영향을 평가하는 데 자주 활용됩니다.

DUOX2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DUOX2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DUOX2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DUOX2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DUOX2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DUOX2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DUOX2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DUOX2 기능에 중요한 DUOX2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DUOX2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DUOX2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DUOX2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DUOX2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DUOX2 HDR 플라스미드 (h) 및 DUOX2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DUOX2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DUOX2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.