Plásmido Doble Nickase (h) Duffy: sc-406288-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Duffy consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Duffy (h) y el plásmido de doble nickasa Duffy (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ACKR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Duffy | sc-406288-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Duffy | sc-406288-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACKR1 codifica el receptor del antígeno Duffy para quimiocinas (DARC), un receptor atípico de quimiocinas expresado de forma destacada en las células endoteliales de vénulas y en los eritrocitos. Duffy se une y secuestra múltiples quimiocinas inflamatorias de las familias CC y CXC, moldeando gradientes de quimiocinas que regulan el tráfico de leucocitos, la activación endotelial y la resolución de la inflamación. A través de su papel como sumidero y transportador de quimiocinas, Duffy modula las redes de señalización inflamatoria e influye en las respuestas del microambiente vascular. La variación genética y la expresión alterada de ACKR1 se utilizan para estudiar diferencias en la homeostasis de quimiocinas y el reclutamiento de células inmunitarias en contextos de enfermedades inflamatorias y hematológicas.
Duffy El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ACKR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ACKR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ACKR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ACKR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.