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dsg2慢病毒激活颗粒(h) | sc-400957-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 DSG2 基因编码桥粒芯糖蛋白-2(desmoglein-2,dsg2),这是一种钙依赖性的桥粒型钙黏蛋白,在上皮组织和心脏组织中介导强大的细胞–细胞黏附。dsg2 通过与 plakoglobin、plakophilins 和 desmoplakin 的相互作用参与桥粒装配与连接结构重塑,将钙黏蛋白复合体连接到中间丝,从而在机械应力下维持组织完整性。DSG2 表达改变或桥粒功能障碍与屏障功能受损、炎症相关的上皮重塑,以及与致心律失常性心肌病相关的心肌细胞连接缺陷有关。这些特性使 DSG2 成为在发育与疾病模型中研究黏附依赖性信号传导、机械转导以及连接结构调控的重要靶点。
dsg2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DSG2 表达。
dsg2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DSG2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性dsg2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DSG2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。