DP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422478

개요

Ptgdr는 마우스 프로스타글란딘 D2 수용체 DP를 암호화하며, DP는 주로 Gs를 통해 신호를 전달해 cAMP를 증가시키고 PKA 의존적 전사 프로그램을 활성화하는 G 단백질 결합 수용체(GPCR)입니다. DP는 아라키돈산 대사를 통해 생성되는 PGD2에 의해 활성화되며, 평활근 긴장도, 혈관 투과성, 점막 염증, 면역세포 이동의 조절에 기여합니다. 백혈구와 장벽 조직에서 DP 연계 신호전달은 사이토카인 생성 및 화학주성과 연결되어 제2형 염증 반응과 신경–면역 간 소통을 형성합니다. PGD2–DP 활성의 조절 이상은 천식 유사 기도 염증, 알레르기 질환, 염증성 통증 경로에 대한 실험 모델에서 관여하는 것으로 보고되어, Ptgdr는 지질 매개체 신호전달을 분석하는 데 유용한 표적 노드로 여겨집니다.

DP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ptgdr 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ptgdr 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ptgdr의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ptgdr 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DP 기능에 중요한 Ptgdr 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ptgdr 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 DP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ptgdr 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DP HDR 플라스미드 (m) 및 DP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ptgdr 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ptgdr 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.