Dorfin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406860

개요

RNF19A는 유비퀴틴 의존적 단백질 품질 관리와 단백질 항상성(proteostasis)에 관여하는 RBR 계열 E3 유비퀴틴 리가아제인 Dorfin을 암호화합니다. Dorfin은 잘못 접히거나 응집되기 쉬운 기질을 인식하고 유비퀴틴화하는 과정에 참여하며, 세포 항상성을 유지하기 위해 소포체(ER) 스트레스 반응과 세포질 분해 경로를 연결합니다. 유비퀴틴 신호 조절과 신경세포 및 스트레스 관련 단백질의 턴오버를 통해 RNF19A는 단백질 응집과 단백질 항상성 조절 이상이 특징인 신경퇴행성 질환 및 기타 질환 맥락에서 연구되어 왔습니다. 또한 RNF19A의 활성은 ER-연관 분해(ERAD), 자가포식 관련 제거, 스트레스 유도 신호 네트워크를 조절하는 경로들과 교차합니다.

Dorfin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RNF19A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RNF19A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RNF19A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Dorfin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Dorfin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RNF19A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Dorfin 기능에 중요한 RNF19A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RNF19A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Dorfin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Dorfin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RNF19A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Dorfin HDR 플라스미드 (h) 및 Dorfin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RNF19A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RNF19A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.