
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
DnaJC3 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-405100-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
DnaJC3 CRISPR 활성화 플라스미드(h2) | sc-405100-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
DNAJC3는 소포체(ER) 연관 Hsp40 공동 샤페론인 DnaJC3를 암호화하며, BiP/GRP78과 상호작용하고 접힘 단백질 반응(UPR) 동안 PERK 매개 신호를 약화시켜 단백질 항상성(proteostasis)을 조절합니다. 샤페론 활성과 ER 스트레스 감지를 연결함으로써 DnaJC3는 번역 조절, 단백질 접힘 능력, 단백질 독성 스트레스에서의 회복을 조절하는 데 기여하며, 그 하위 결과로 세포사멸과 염증성 신호에도 영향을 줍니다. DnaJC3가 관여하는 ER 스트레스 경로의 조절 이상은 대사 및 신경퇴행성 맥락에서 세포 취약성과 연관되어 왔는데, 만성적인 UPR 활성화가 분비 기능과 미토콘드리아 항상성을 손상시킬 수 있기 때문입니다. ER 품질 관리의 한 축으로서 DnaJC3는 영양 또는 산화 스트레스 하에서의 스트레스 적응, 프로테옴 재구성, 세포 운명 결정에 대한 기전 연구에 중요한 표적입니다.
DnaJC3 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 DNAJC3 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
DnaJC3 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 DNAJC3 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 DNAJC3 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 DnaJC3 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 DNAJC3 위치를 보존하고 내인성 위치에서 DnaJC3 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 DNAJC3 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 DnaJC3 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.