DnaJB6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404227

개요

DNAJB6는 Hsp70과 협력하여 기저 상태 및 스트레스 조건에서 단백질 접힘, 분류(triage), 그리고 단백질 항상성(proteostasis)을 조절하는 Hsp40/DnaJ 보조 샤페론(co-chaperone) 계열의 구성원인 DnaJB6를 암호화합니다. DnaJB6는 오접힌 단백질의 응집을 억제하는 데 관여하며, 세포골격 조직화, 샤페론-보조 품질 관리, 그리고 세포 항상성에 영향을 미치는 스트레스 반응성 신호전달에도 기여합니다. DNAJB6 기능의 교란은 단백질 응집과 근육 병리를 특징으로 하는 질환(사지대 근이영양증 포함)과 연관되어 왔고, 신경퇴행과 관련된 단백질 독성 스트레스(proteotoxic stress) 맥락에서도 연구되고 있습니다. 이러한 생물학적 연관성 때문에 DNAJB6는 응집, 샤페론 네트워크, 그리고 오접힌 단백질에 대한 세포의 회복탄력성을 조절하는 경로를 규명하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.

DnaJB6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DNAJB6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DNAJB6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DNAJB6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DnaJB6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DnaJB6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DNAJB6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DnaJB6 기능에 중요한 DNAJB6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DNAJB6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DnaJB6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DnaJB6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DNAJB6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DnaJB6 HDR 플라스미드 (h) 및 DnaJB6 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DNAJB6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DNAJB6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.